问:  逆转录引物是选择Oligo dT还是随机引物?
答: 二者各有优缺点, Oligo dT只和mRNA的PolyA结合，因此它只把mRNA逆转录成cDNA, 而且是从mRNA的3'端向5'延伸完成cDNA的合成。而随机引物可以和所有种类的RNA结合，包括mRNA、tRNA、rRNA等，它合成的cDNA显示要复杂得多, PCR时可能会造成特异性差的问题.如果实验目的是检测mRNA，建议首选Oligo dT，只有在RNA二级结构复杂，Oligo dT不能成功反转录出目的cDNA片段时才考虑选择随机引物，这样有可能可以绕开RNA二级结构复杂的位置。随机引物还用于检测非mRNA分子的情况，如内参是核糖体RNA时，就只能用随机引物，因为核糖体RNA没有Poly A，Oligo dT无法和其结合，自然不能选用。